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(GB/T 19681-2005) 食品中蘇丹紅染料的檢測(cè) 氧化鋁 SPE - HPLC 法
發(fā)布日期:2019-03-29

(1) 樣品提取及凈化

1.1 紅辣椒粉等粉狀樣品

稱取1g～5g(準(zhǔn)確至0.001g)樣品于三角瓶中，加入10mL～30mL正己烷，超聲5min，過(guò)濾，用10mL正己烷洗滌殘?jiān)鼣?shù)次，至洗出液無(wú)色，合并正己烷液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至5mL以下，慢慢加入Cleanert Alumina-N柱中，為保證層析效果，在柱中保持正己烷液面為2mm左右時(shí)上樣，在全程的層析過(guò)程中不應(yīng)使柱干涸，用正己烷少量多次淋洗濃縮瓶，一并注入層析柱?？刂蒲趸X表層吸附的色素帶寬宜小于0.5cm，待樣液完全流出后，視樣品中含油類雜質(zhì)的多少用10mL～30mL正己烷洗柱，直至流出液無(wú)色，棄去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60mL洗脫，收集、濃縮后，用丙酮轉(zhuǎn)移并定容至5mL，經(jīng)0.45μm濾器過(guò)濾后待測(cè)。

1.2 紅辣椒油、火鍋料、奶油等油狀樣品

稱取0.5g～2g(準(zhǔn)確至0.001g)樣品于小燒杯中，加入適量正己烷溶解(約1mL～10mL)，難溶解的樣品可于正己烷中加溫溶解。按1.1中“慢慢加入到Cleanert Alumina-N柱中……過(guò)濾后待測(cè)”操作。

1.3 辣椒醬、番茄沙司等含水量較大的樣品稱取10g～20g(準(zhǔn)確至0.01g)樣品于離心管中，加10mL～20mL水將其分散成糊狀，含增稠劑的樣品多加水，加入30mL正己烷：丙酮 = 3：1，勻漿5min，3000rpm離心10min，吸出正己烷層，于下層再加入20mL×2次正己烷勻漿，離心，合并3次正己烷，加入無(wú)水硫酸鈉5g 脫水，過(guò)濾后于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干并保持5分鐘，用5mL正己烷溶解殘?jiān)螅?.1中“慢慢加入到Cleanert Alumina-N柱中……過(guò)濾后待測(cè)”操作。

1.4 香腸等肉制品

稱取粉碎樣品10g～20g(準(zhǔn)確至0.01g)于三角瓶中，加入60mL正己烷充分勻漿5min，濾出清液，再以20mL×2次正己烷勻漿，過(guò)濾。合并3次濾液，加入5g無(wú)水硫酸鈉脫水，過(guò)濾后于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸至5mL以下，按1.1中“慢慢加入到Cleanert Alumina-N柱中……過(guò)濾后待測(cè)”操作。

(2) 檢測(cè)方法

色譜柱： Venusil ASB C18 4.6mm×150mm 3μm

流動(dòng)相：溶劑A ：0.1%甲酸的水溶液：乙腈 = 85：15   溶劑B： 0.1%甲酸的乙腈溶液：丙酮=80：20

梯度洗脫：流速：1mL/min 柱溫：30℃ 檢測(cè)波長(zhǎng)：蘇丹紅Ⅰ 478nm ；蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅Ⅳ 520nm ；于蘇丹紅Ⅰ出峰后切換。進(jìn)樣量：10μL。梯度條件見表1。

表1 流動(dòng)相梯度條件:


流動(dòng)相


時(shí)間(min)

A%

B%

曲線

0

25

75

線性

10

25

75

線性

25

0

100

線性

32

0

100

線性

35

25

75

線性

40

25

75

線性

(3) 訂貨信息:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格包裝

訂貨號(hào)

LC-10F高效液相色譜儀

10mL/min,   梯度系統(tǒng),200-800nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)器

FL-LC010GS

CC-100分析型色譜柱溫箱

溫控范圍：5-70℃可安裝1-2支300mm色譜柱

CC-100

Cleanert  Alumina-N固相萃取柱

4g/12mL, 20支/pk

AL400012-N

Venusil ASB   C18液相色譜柱

4.6mm×150mm, 3μm

VS931505-0

針式過(guò)濾器(PTFE)

0.22μm,直徑13mm,200/pk

AS041320

一次性無(wú)針頭注射器

5mL, 100/pk

ZSQ-5ML

1.5mL樣品瓶

短螺紋透明帶書寫32×11.6mm,   100/pk

1109-0519

1.5mL樣品瓶蓋

9 mm中心孔藍(lán)蓋，紅色橡膠/米色PTFE隔墊,45．Shore A 1.0mm,100/pk

0915-1819

正己烷

4×4L/瓶

AH216-4

注：由于有些樣品，基質(zhì)干擾嚴(yán)重，如辣椒油、火鍋油等，需要使用4g/12mL 的規(guī)格，才能有較好的回收率，具體方法可咨詢400-

606-8099”。

具體請(qǐng)參考：GB/T 19681-2005 食品中蘇丹紅染料的檢測(cè)方法 高效液相色譜法 

應(yīng)用編號(hào)：AF10049